本书内容来源于编写团队主持和参与的多项国家自然科学基金项目,包含“麦胚活性肽概述”“麦胚活性肽制备与鉴定”“麦胚活性肽改善氧化应激的作用及机制”“麦胚活性肽对II型糖尿病的改善作用”“麦胚活性肽延缓老年性骨质疏松的作用及机制”“麦胚活性肽促进伤口愈合的作用及其应用”“麦胚活性肽改善DSS诱导小鼠结肠炎的作用及机制”七章内容,旨在梳理麦胚活性肽的生物学功能及作用机制,阐述最新的麦胚活性肽营养学研究进展。
第1章 麦胚活性肽概述 001
1.1 活性肽(氨基酸、肽与蛋白质) 001
1.2 活性肽制备 003
1.2.1 肽的制备 003
1.2.2 肽的分离和纯化方法 008
1.3 麦胚活性肽的功能 010
1.3.1 麦胚活性肽与抗氧化活性 011
1.3.2 麦胚活性肽与糖脂代谢 013
1.3.3 麦胚活性肽与成骨活性 015
1.3.4 麦胚活性肽与抗炎活性 016
1.3.5 麦胚活性肽与抗癌活性 017
1.3.6 麦胚活性肽与肠道菌群 018
参考文献 019
第2章 麦胚活性肽制备与鉴定 027
2.1 麦胚清蛋白提取与鉴定 027
2.1.1 脱脂麦胚粉的制备 027
2.1.2 清蛋白提取单因素实验 028
2.1.3 清蛋白提取正交实验 029
2.1.4 清蛋白含量测定 030
2.2 酶解法制备麦胚活性肽工艺优化与纯化 031
2.2.1 酶解法制备麦胚活性肽Ⅰ工艺优化与纯化 031
2.2.2 酶解法制备麦胚活性肽Ⅱ工艺优化与纯化 037
2.3 麦胚活性肽的结构鉴定 050
2.3.1 麦胚活性肽Ⅰ结构鉴定 050
2.3.2 麦胚活性肽Ⅱ结构鉴定 054
本章小结 057
参考文献 057
第3章 麦胚活性肽改善氧化应激的作用及机制 060
3.1 麦胚活性肽体外抗氧化性研究 060
3.1.1 麦胚活性肽氧自由基吸收能力 060
3.1.2 麦胚活性肽ABTS+·清除能力 062
3.1.3 麦胚活性肽DPPH+·清除能力 064
3.2 麦胚活性肽抗细胞氧化应激的作用 066
3.2.1 麦胚活性肽对H2O2诱导的VSMCs氧化应激的抑制作用 066
3.2.2 麦胚活性肽对H2O2诱导的HepG2氧化应激的抑制作用 070
3.3 麦胚活性肽抗2型糖尿病小鼠体内氧化应激的作用 073
3.3.1 麦胚活性肽对STZ小鼠血糖的影响 073
3.3.2 麦胚活性肽对糖尿病小鼠主动脉异常增殖的作用 074
3.3.3 麦胚活性肽对糖尿病小鼠保护作用可能的机制 075
3.3.4 麦胚活性肽对糖尿病小鼠肝脏中T-AOC和SOD水平的影响 076
3.3.5 麦胚活性肽对糖尿病小鼠肝脏中MDA水平的影响 077
3.3.6 麦胚活性肽对糖尿病小鼠血清中炎症因子水平的影响 078
3.4 麦胚活性肽抗氧化应激作用机制 079
3.4.1 麦胚活性肽对NOX4表达的影响 079
3.4.2 麦胚活性肽对PKCζ磷酸化水平的影响 081
3.4.3 麦胚活性肽对AMPKα磷酸化水平的影响 081
3.4.4 抗氧化肽对AMPK的激活作用 082
本章小结 083
参考文献 083
第4章 麦胚活性肽对2型糖尿病的改善作用 087
4.1 活性肽治疗糖尿病研究现状 087
4.2 麦胚活性肽对胰岛素抵抗的作用 088
4.2.1 IR-HepG2模型的建立 088
4.2.2 麦胚活性肽的筛选 090
4.2.3 麦胚活性肽对糖原含量的影响 092
4.2.4 麦胚活性肽对HK、PK的影响 094
4.3 麦胚活性肽对2型糖尿病大鼠病症的改善作用 094
4.3.1 麦胚活性肽对大鼠基础生理指标的影响 095
4.3.2 麦胚活性肽对大鼠胰岛素抵抗指数的影响 096
4.3.3 麦胚活性肽对大鼠血浆脂质指标的影响 099
4.3.4 麦胚活性肽对大鼠肝脏糖原含量的影响 101
4.3.5 麦胚活性肽对大鼠肝脏HK、PK的影响 101
4.4 麦胚活性肽治疗2型糖尿病机制 102
4.4.1 麦胚活性肽对胰岛素信号通路相关蛋白表达的影响 103
4.4.2 麦胚活性肽对糖代谢相关蛋白表达的影响 105
4.4.3 麦胚活性肽对大鼠肝脏脂代谢相关蛋白表达的影响 110
本章小结 114
参考文献 114
第5章 麦胚活性肽延缓老年性骨质疏松的作用及机制 118
5.1 活性肽对骨质疏松作用的现状 119
5.2 麦胚活性肽ADW对氧化应激环境中共育体系下成骨和破骨细胞活性的影响 120
5.2.1 OB-OC共育体系下氧化应激模型的构建 120
5.2.2 麦胚活性肽ADW对H2O2诱导的共育体系下成骨细胞氧化应激水平的影响 123
5.2.3 麦胚活性肽ADW对H2O2诱导的共育体系下成骨细胞增殖活性的影响 125
5.2.4 麦胚活性肽ADW对H2O2诱导的共育体系下成骨细胞分化活性的影响 126
5.2.5 麦胚活性肽ADW对H2O2诱导的共育体系下成骨细胞凋亡的影响 128
5.2.6 麦胚活性肽ADW对H2O2诱导的共育体系下破骨细胞分化的影响 129
5.3 麦胚活性肽ADW对老年性大鼠骨质疏松的作用 130
5.3.1 麦胚活性肽ADW对老年大鼠血清骨重建指标的影响 130
5.3.2 麦胚活性肽ADW对老年大鼠氧化应激指标的影响 131
5.3.3 麦胚活性肽ADW对老年大鼠股骨形态计量学的影响 133
5.3.4 麦胚活性肽ADW对老年大鼠股骨微观结构的影响 133
5.3.5 麦胚活性肽ADW对老年大鼠股骨成骨细胞和破骨细胞分化活性的影响 136
5.4 麦胚活性肽ADW对骨稳态失衡的作用机制 138
5.4.1 麦胚活性肽ADW对老年骨质疏松大鼠成骨细胞增殖活性的影响 138
5.4.2 麦胚活性肽ADW对老年骨质疏松大鼠成骨细胞分化活性的影响 138
5.4.3 麦胚活性肽ADW对老年骨质疏松大鼠成骨细胞凋亡的影响 140
5.4.4 麦胚活性肽ADW对H2O2诱导的共育体系下TRAF6信号通路的影响 141
5.4.5 麦胚活性肽ADW对老年骨质疏松大鼠TRAF6信号 通路的影响 143
5.4.6 麦胚活性肽ADW对老年骨质疏松大鼠破骨细胞分化的影响 143
本章小结 146
参考文献 147
第6章 麦胚活性肽促进伤口愈合的作用及其应用 158
6.1 多肽促进伤口愈合的研究现状 158
6.2 麦胚活性肽YDW对巨噬细胞、成纤维细胞、角质形成细胞作用的研究 160
6.2.1 小肽分子量及纯度 160
6.2.2 小肽YDW对巨噬细胞RAW 264.7炎症反应的影响 161
6.2.3 小肽YDW对成纤维细胞L929活性的影响 165
6.2.4 小肽YDW对角质形成细胞HaCaT活性的影响 169
6.3 麦胚活性肽对大鼠伤口愈合作用 172
6.3.1 小肽YDW对大鼠伤口愈合率的影响 172
6.3.2 小肽YDW对大鼠伤口组织中NO的影响 173
6.3.3 小肽YDW对大鼠伤口组织中炎症因子的影响 174
6.3.4 大鼠伤口组织的病理学分析 176
6.3.5 大鼠伤口组织的免疫荧光分析 177
6.4 麦胚活性肽乳膏的制备及检测 179
6.4.1 乳膏组成优化 179
6.4.2 小肽YDW乳膏基本性质 181
本章小结 192
参考文献 193
第7章 麦胚活性肽对DSS诱导小鼠结肠炎的改善作用及机制 195
7.1 溃疡性结肠炎发病机制和研究现状 195
7.2 麦胚蛋白质体外模拟消化活性肽的筛选及其对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞的抗炎作用 196
7.2.1 麦胚蛋白质体外模拟消化过程中水解度的变化 196
7.2.2 超滤膜分离和多肽含量 197
7.2.3 麦胚抗炎活性肽的筛选 197
7.2.4 Nano-LC-MS/MS鉴定WGPH-Ⅲ(<1kDa)多肽序列 199
7.2.5 麦胚活性肽P1、P2、P3和P4分别对LPS诱导的RAW 264.7细胞NO分泌量的影响 201
7.2.6 麦胚活性肽P1对LPS诱导的RAW?264.7细胞炎症介质的影响 202
7.2.7 麦胚活性肽P1对RAW 264.7细胞PKCζ-NF-κB信号通路蛋白表达的影响 203
7.3 麦胚活性肽对DSS诱导的小鼠结肠炎缓解作用 206
7.3.1 麦胚活性肽P1干预后结肠炎小鼠疾病活动指数(DAI) 206
7.3.2 麦胚活性肽P1干预后对结肠炎小鼠体重的影响 207
7.3.3 麦胚活性肽P1干预后对结肠炎小鼠结肠的影响 208
7.3.4 麦胚活性肽P1干预后对结肠炎小鼠脾脏指数的影响 209
7.3.5 麦胚活性肽P1干预后对结肠炎小鼠结肠组织病变的影响 209
7.3.6 麦胚活性肽P1干预后对血清中炎症因子(IL-1β、IL-6及TNF-α)和结肠组织中MPO活性的影响 211
7.3.7 麦胚活性肽P1干预后对结肠炎小鼠结肠组织中肠屏障功能的影响 212
7.3.8 麦胚活性肽P1干预后对结肠组织中PKCζ-NF-κB信号通路相关蛋白质表达的影响 212
7.4 麦胚活性肽对DSS诱导的结肠炎小鼠肠道菌群的影响 215
7.4.1 测序数据基本信息和质量控制 215
7.4.2 α多样性分析 216
7.4.3 麦胚活性肽P1对结肠炎小鼠肠道菌群物种组成的影响 217
7.4.4 基于Uni Firac的多样品相似度树分析 218
7.4.5 麦胚活性肽P1对不同水平的菌群相对丰度影响 219
7.4.6 肠道菌群优势属与生理生化水平的相关性 226
本章小结 228
参考文献
附录 缩略词表 233