本书通过体内实验为主、体外实验为辅的方式介绍口腔硬组织及骨相关硬组织常用的实验方法。主要内容包括实验动物建模、标本取材处理、组织学及分子生物学实验、硬组织相关细胞培养及相关科研试剂配置等实验技术及方法。同时，列举出口腔硬组织研究人员在科研过程中可能遇到的实验问题，并且给读者呈现相应的具体的解决办法。本书以通俗易懂的文字详尽叙述了每种实验操作技术流程，其中并附以清晰的实验图片供广大研究人员参考，旨在为读者提供详细准确的实验操作流程，具有极强的实用性。
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中华口腔医学会口腔病理学专业委员会常委，主持国家自然科学基金面上项目、青年项目、博士后科学基金特别资助项目等10项。
目录
第一章 口腔疾病动物模型建立方法 1
第一节 牙体牙髓疾病动物模型的建立方法 1
第二节 牙周炎动物模型的建立方法 10
第三节 颞下颌关节紊乱动物模型的建立方法 13
第二章 实验动物麻醉与标本取材 17
第一节 取材前准备 17
第二节 口腔标本取材 24
第三节 取材前灌流固定的方法 27
第四节 原位杂交实验标本取材 29
第五节 组织学及组织化学实验标本取材 31
第六节 聚合酶链式反应实验标本取材 32
第七节 Western blot实验标本取材 33
第三章 实验动物口腔标本处理 36
第一节 组织标本固定 36
第二节 标本脱钙 37
第三节 标本包埋 41
第四章 组织切片制作 59
第一节 石蜡切片制作 59
第二节 冰冻切片制作 65
第三节 超薄切片制作 70
第四节 硬组织切片制作 75
第五章 组织学和组织化学实验操作流程 83
第一节 组织学实验操作流程 83
第二节 组织化学实验操作流程 85
第三节 免疫组织化学实验操作流程 90
第四节 荧光染色实验操作流程 95
第五节 复染操作流程 100
第六章 特殊染色 103
第一节 软骨-骨组织特殊染色 103
第二节 胶原组织特殊染色 109
第三节 骨组织染色 113
第四节 蛋白质特殊染色：Stains All染色 119
第五节 X-Gal染色 121
第六节 双荧光标记 123
第七章 口腔硬组织X线、Micro-CT及扫描电子显微镜成像 126
第一节 X线成像 126
第二节 Micro-CT成像 128
第三节 扫描电子显微镜成像 130
第八章 蛋白质提取及Western blot操作流程 138
第一节 组织及细胞蛋白质提取 138
第二节 Western blot操作流程 145
第九章 DNA/RNA提取、PCR及原位杂交操作流程 159
第一节 DNA/RNA提取及鉴定操作流程 159
第二节 PCR操作流程 171
第三节 原位杂交操作流程 179
第十章 口腔硬组织相关细胞培养 190
第一节 细胞培养概述 190
第二节 成牙本质细胞培养 201
第三节 成釉细胞培养 202
第四节 成骨细胞培养 203
第五节 牙周膜成纤维细胞培养 204
第六节 牙髓干细胞培养 206
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